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親和層析填料種類眾多,達(dá)四五十種,而新的親和填料不斷的被開發(fā)出來(lái)。親和填料純化原理主要是根據(jù)蛋白與配基之間的特異性結(jié)合的原理,將能與蛋白特異性結(jié)合的配基交聯(lián)到填料上,就可以純化特定的蛋白。親和填料操作簡(jiǎn)單,純化效果好,基本一步就可以將蛋白純化成很好的純度。現(xiàn)實(shí)分離純化過程中,越來(lái)越多的蛋白的分離都在使用或者尋找親和的方法。親和填料種類眾多,以下簡(jiǎn)單介紹幾種常用的填料類型。
以蛋白為配基系列的親和填料
(1)Protein A 和耐堿 Protein A 親和填料
Protein A 是來(lái)自于金黃色葡萄球菌細(xì)胞壁的一種蛋白 ,可以特異性結(jié)合哺乳動(dòng)物 IgG 的 Fc片段。因此,將 Protein A 蛋白交聯(lián)到瓊脂糖球上,就可以純化哺乳動(dòng)物抗體。本公司自主構(gòu)建生產(chǎn)與天然 Protein A結(jié)構(gòu)類似的重組 Protein A 蛋白,以及經(jīng)過人工改造的可以耐堿的 Protein A 蛋白。根據(jù)配基 Protein A蛋白耐堿與否 , 可以將填料分為 rProtein A Welchrom 和耐堿 rProtein A Welchrom ,根據(jù)基球類型可分為 rProtein A Welchrom 4B、rProtein A Welchrom 4FF、rProtein A Welchrom Cap 和耐堿 rProtein A Welchrom 4B、耐堿 rProtein A Welchrom 4FF、 耐堿 rProtein A Welchrom Cap 等幾種填料。
(2)Protein G 親和填料
Protein G 是鏈球菌表面的一種細(xì)胞壁蛋白 ,可以特異性結(jié)合哺乳動(dòng)物IgG 的Fc 片段 ,其親和范圍比 Protein A 廣,尤其對(duì)抗體亞型有很好的純化效果。被廣泛用于腹水、細(xì)胞培養(yǎng)液以及 Fc 融合蛋白的純化。
本公司主要的 Protein G 填料類型有 rProtein G Welchrom 4B和 rProtein G Welchrom 4FF 兩種。
(3)Protein L 親和填料
Protein L 是從馬格努斯消化鏈球菌分離出來(lái)的能和免疫球蛋白特異性結(jié)合的蛋白質(zhì),與 A、 G 不同的是, Protein L 專一性結(jié)合抗體輕鏈部分。蛋白 L 結(jié)合更寬范圍的抗體類大于蛋白 A 或 G 蛋白 L 結(jié)合所有抗體類,包括 IgG,IgM,IgA 的,IgE 和 IgD 的代表。盡管有很寬的結(jié)合范圍內(nèi),蛋白質(zhì) L 不是一個(gè)通用的抗體結(jié)合蛋白。 L 蛋白結(jié)合僅限于那些含有κ輕鏈的抗體,在人類和小鼠抗體,抗體分子除了包含κ輕鏈,其余有ι輕鏈。例如,它結(jié)合人 VκI,VκIII 和 VκIV 亞型但不結(jié)合 VκII 亞型。
本公司主要的產(chǎn)品類型有 rProtein L Welchrom 4B 和 rProtein L Welchrom 4FF。