做HPLC分析時(shí),系統(tǒng)無(wú)壓力
1)流動(dòng)相粘度過(guò)高、被污染,建議選擇合適的流動(dòng)相和比例,重新配置,用0.45微米濾膜進(jìn)行過(guò)濾。
2)流動(dòng)相內(nèi)的緩沖鹽引起單向閥堵塞,將流速設(shè)定在5mL/min,擰松排氣閥并purge。
3)泵內(nèi)有氣體,將流速設(shè)定在5mL/min,擰松排氣閥并purge。
4)高壓密封墊變形,建議更換新的高壓密封墊。
1)泵內(nèi)有空氣,解決的辦法是清除泵內(nèi)空氣,對(duì)溶劑進(jìn)行脫氣處理。
2)比例閥失效,更換比例閥即可。
3)泵密封墊損壞,更換密封墊即可。
4)溶劑中的氣泡,解決的辦法是對(duì)溶劑脫氣,必要時(shí)改變脫氣方法。
5)系統(tǒng)檢漏,找出漏點(diǎn),密封即可。
6)梯度洗脫,這時(shí)壓力波動(dòng)是正常的。
HPLC分析測(cè)試時(shí)柱壓過(guò)高
柱壓過(guò)高是HPLC柱用戶最常碰到的問(wèn)題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問(wèn)題,您可按下面步驟檢查問(wèn)題的起因:
1)拆去保護(hù)預(yù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問(wèn)題,若柱壓仍高,再檢查。
2)把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
3)將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子,(此時(shí)不要連接檢測(cè)器,以防固體顆粒進(jìn)入流動(dòng)池)。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查。只用于使用過(guò)的柱子。
4)更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說(shuō)明您的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請(qǐng)與廠商聯(lián)系。一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過(guò)濾器便可避免柱壓過(guò)高的問(wèn)題。
5)進(jìn)樣器堵塞,用注射器抽取適量純凈水(多于定量環(huán)體積),注入進(jìn)樣口,從廢液瓶流出,重復(fù)5次。
平頭峰:
1)檢測(cè)池污染,清洗檢測(cè)池。
2)紫外燈性能極限或故障,更換性能更強(qiáng)的紫外燈。
3)進(jìn)樣量過(guò)大,減少進(jìn)樣量。
分叉峰:
1)保護(hù)柱被污染,更換新的保護(hù)柱。
2)色譜柱被污染,對(duì)色譜柱沖洗過(guò)夜。
3)進(jìn)樣閥被污染,用注射器抽取適量純凈水(多于定量環(huán)體積),注入進(jìn)樣口,從廢液瓶流出,重復(fù)5次。
4)檢測(cè)池被污染,清洗檢測(cè)池。
5)溶劑選擇不合理,合理選擇溶劑。
6)進(jìn)樣量過(guò)大,減少進(jìn)樣量。
拖尾峰:
1)色譜柱被污染,更換新的色譜柱。
2)進(jìn)樣量過(guò)大,減少進(jìn)樣量。
3)流動(dòng)相配比不合理,用合理的配比制造流動(dòng)相。
4)流動(dòng)相流速不合理,合理調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速。
5)色譜柱選擇不合理,選擇合適的色譜柱。
6)樣品不純,對(duì)樣品進(jìn)行純化。
伸舌峰:
1)柱溫過(guò)低,合理調(diào)節(jié)柱溫。
2)溶劑并非流動(dòng)相,用流動(dòng)相溶解樣品。
3)流動(dòng)相配比不合理,用合理的配比樹(shù)造流動(dòng)相。
4)流動(dòng)相流速不合理,合理調(diào)節(jié)流動(dòng)相流速。