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光化學衍生(PCD)方法綜述
更新時間:2021-10-13 點擊次數(shù):3026
光化學衍生(PhotoChemical Derivatization, PCD)分析法是基于光化學反應而建立的一類分析方法,它以其*的衍生方式與傳統(tǒng)的熒光,化學發(fā)光,紫外-可見,電化學等檢測方法相結(jié)合,提高了原有方法的靈敏度與選擇性,極大地拓展了傳統(tǒng)檢測方法的應用范圍,在藥物、復雜生物樣品,環(huán)境樣品分析測定等方面得到廣泛應用。
光化學衍生器的使用十分簡單,將光化學衍生器的兩端管路分別連接到色譜柱的出口端和熒光檢測器的入口端,然后打開儀器開關等待紫外燈穩(wěn)定即可使用。
1. 黃曲霉毒素G1和B1衍生
自然界中的霉菌分布廣泛,種類繁多,據(jù)聯(lián)合國糧農(nóng)組織估計,目前世界上至少有25%左右的谷物被霉菌毒素污染,其中最為嚴重的是黃曲霉毒素的污染,它們是一類具有相似結(jié)構(gòu)的二氫呋喃雜氧萘的衍生物,有B1, B2, G1, G2, M1等,其中B1毒性*,是qin化鉀的10倍,pi霜的68倍,但用熒光檢測器檢測時,B1和G1的響應很低,需要進行衍生增強才能檢測到。
月旭科技WelView光化學衍生器經(jīng)過優(yōu)化的衍生管路能夠顯著提升樣品衍生效果,使用黃曲毒霉素混標進行測試發(fā)現(xiàn)相同的色譜條件下衍生后G1和B1的峰面積是未衍生時的8倍和6倍以上。
黃曲毒霉素混標未衍生譜圖
(來源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫)
黃曲毒霉素混標衍生后譜圖
(來源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫)
2. 磺胺類藥物衍生
磺胺類藥物(Sulfonamides)是一類人工合成的抗菌藥,具有效價高、抗菌譜廣,毒性小,使用方便等特點,而廣泛使用于畜牧業(yè)生產(chǎn)。但其不合理的使用會通過肉類食品在人體蓄積,造成危害。由于質(zhì)譜檢測成本高,紫外檢測靈敏度低,選擇性差,應用有局限性。推薦采用光化學衍生方法對樣品進行衍生后進行熒光檢測分析,能夠獲得較好的檢測效果。
如下例中,對于SDZ, SPD, SMR, SM2, SMD, SQX等六種磺胺類藥物衍生前后的對比圖。
六種磺胺類藥物衍生后譜圖
(來源:月旭色譜數(shù)據(jù)庫)
3. 硫肟醚類農(nóng)藥衍生
硫肟醚是國家南方農(nóng)藥創(chuàng)制中心湖南基地研制成功的2種新型殺蟲劑,對多種害蟲具有優(yōu)良的防治效果,硫肟醚類農(nóng)藥測定方法主要有光化學熒光法和質(zhì)譜法,質(zhì)譜法成本較高,難以推廣。通過光化學衍生法可實現(xiàn)衍生產(chǎn)物的高靈敏度檢測。
虛線:未開衍生器的譜圖,
1和2兩種硫肟醚沒有熒光發(fā)射。
實線:打開衍生器后,
1和2兩種硫肟醚均有較強的熒光。
(來源:DOI 10.3321/j.issn:0253-3820.2007.06.028)
4. 強化食品中葉酸含量測定時衍生增強
葉酸是一種重要的B族維生素,是機體細胞生長和繁殖的必需物質(zhì),是維持生物體正常生命過程所必需的一類有機物質(zhì),與新生兒缺陷,心血管疾病,精神疾病,胃腸功能異常,免疫缺陷及腫瘤等具有相關性。
葉酸的檢測方法比較多,HPLC可實現(xiàn)葉酸的*分離,特異性高,但葉酸一般含量低,熒光很弱,痕量分析時,推薦采用光化學衍生方法,葉酸在254nm紫外光照射后光化學產(chǎn)物的熒光強度能得到較大增強,用于片劑或維生素制劑中痕量葉酸的測定。方法具有操作簡便,無需要外加試劑,重現(xiàn)性好,選擇性好,靈敏度高的特點。
(來源:DOI 10.13590/j.cjfh.2014.04.011)
如上圖,對于奶粉等樣品進行分析,流動相為50mmol/L lin酸二氫鉀水溶液(pH=5.0)和乙腈,采用梯度洗脫,改善峰形,與雜質(zhì)有效分開。
5. 辣椒油中4種su丹紅染料的的分析
su丹紅是一類人工合成的以苯基偶氮萘酚為主要基團的偶氮染料,其外觀為暗紅色或深黃色片狀體,是親脂性化合物,具有潛在致癌性,我國和歐盟都禁止添加在食品中。
su丹紅檢測方法較多,但都有選擇性差或檢測成本高等問題,大批量樣品的快速測定,推薦采用HPLC+PCD+FLD的方法,達到選擇性好、靈敏度高和價格友好的檢測。這種方法對于su丹紅Ⅲ和su丹紅B的檢測限比PDA檢測方法低一個數(shù)量級。
虛線:未開衍生器的譜圖,4種su丹紅沒有熒光發(fā)射。
實線:打開衍生器后,4種su丹紅均有較強的熒光。
(來源:DOI 10.3724/SP.J.1123.2012.01015)
除此之外,光化學衍生方法在核黃素檢測、多種維生素檢測、多種霉菌/真菌,以及離子色譜分析領域有多種應用。