壽命

色譜柱壽命不理想的問題一直困擾著眾多實驗室的小伙伴們，針對各品牌色譜柱的壽命表現(xiàn)均低于它們的普遍壽命的情況，不少小伙伴紛紛表示其玻璃心不堪色譜柱年輕即逝的打擊。對此，月旭科技為您仔細研究了色譜柱的“長生不老”之術(shù)，解決色譜柱壽命不理想的問題，話不多說，快跟隨小編腳步一起往下看吧！

月旭科技將為您提供以下解決思路

01 di一步

自查：

1、是否使用同填料保護柱（相同品牌）；

2、流動相從配置到棄用在 12 小時以內(nèi)；

3、流動相瓶子嚴格清洗干燥，密封；

4、濾頭濾膜材質(zhì)和品質(zhì)是否選擇錯，注意查看是否使用后有溶解現(xiàn)象；

5、使用廠家推薦的沖洗方式?jīng)_洗色譜柱。

02 第二步

以上自查項目改善后均不能解決，則采取第二步：與廠家溝通，建議寄回廠家進行色譜柱“解剖”，月旭科技擁有多年專業(yè)“解剖”各種問題色譜柱的經(jīng)驗，為您總結(jié)出可能出現(xiàn)的原因如下：

原因一：色譜柱污染

可能出現(xiàn)的原因

1、樣品組分吸附在色譜柱的前端

a、可能是由于樣品在流動相中的溶解度低而沉淀出來的；

b、樣品中有強保留物質(zhì)（與鍵合相極性相似的物質(zhì)）；

c、樣品或者流動相中與填料表面發(fā)生微弱的不可預知的化學反應；

d、樣品溶劑本身的pH值在色譜柱的耐受臨界值附近，而且進樣體積較大（內(nèi)徑4.6mm，上樣體積在 50μl 以上）。

通常這樣的情況伴隨柱壓升高；或者柱壓正常，一個色譜圖中出現(xiàn)有些峰形異常，有些峰形正常的情況。

解決方法

a、 盡量從根源上解決問題，選擇合適的樣品前處理技術(shù)，去除掉強保留物質(zhì)，獲得更加“干凈”更加成分單一的樣品；

b、 使用保護柱，保護柱的選擇盡量與分析柱同等填料，同等鍵合方法的保護柱，如果使用不同品牌填料、不同裝填工藝的保護柱，在分離能力和保護方面可能得不到ZH的效果，也不要使用更大粒徑的保護柱，更大粒徑或者裝填較差的保護柱會因為它的峰展寬作用而導致分離能力下降。

2、流動相“臟”了

流動相在色譜柱中的使用量比樣品要大得多，不停的沖刷色譜柱，如果流動相變質(zhì)或者有其他的污染物，那對色譜柱的污染會比樣品更大，色譜柱對流動相反而是一種凈化，而且在運行梯度時，還會出現(xiàn)鬼峰。

解決方法

a、流動相配置后盡快使用，多不超過 12 小時；

b、有機相和鹽相混合的流動相，更容易導致鹽的析出，盡量使用在線混合，且在運行梯度時變化速率不宜太快，避免鹽析出；

c、用專業(yè)的經(jīng)過鈍化處理過的溶劑瓶裝流動相，切忌不能使用塑料瓶，做好密封，在更換流動相的時候同時更換試劑瓶；

d、水在接觸空氣或者離開制水設備以后會出現(xiàn)變質(zhì)，現(xiàn)用現(xiàn)制，打開后盡快使用。

原因二 固定相損壞

由色譜條件的多方面作用而導致的固定相損壞，是目前的色譜技術(shù)不能解決的一個問題。一般情況下小基團鍵合相更容易被水解而脫落，加快了鍵合相的脫落。硅膠裸露以后暴露在流動相中，增加了鹽等對硅膠骨架的攻擊，導致骨架變薄，機械強度降低，表現(xiàn)為柱頭塌陷。

可能出現(xiàn)的原因

a、流動相中的鹽，尤其是磷酸類的緩沖鹽，對硅膠的攻擊是較強的；

b、高柱溫，加快鹽運動的速率；

c、高氧，流動相中未排除的氧，會加快硅膠內(nèi)部鍵的斷裂；

d、高pH（＞8），OH 根離子攻擊硅膠內(nèi)部的 Si-O-Si 鍵，導致硅膠直接破碎；

e、低 pH（＜2），H 根離子攻擊硅膠表面的 Si-C 鍵，鍵合相脫落以后，硅膠裸露出來；

f、高水，也是引起鍵合相水解硅膠裸露的重要誘因。

解決方法

a、使用鹽的時候，柱溫 ≤30℃；

b、鹽的濃度使用在 50mmol 以下；

c、使用在線脫氣機或者超聲脫氣（10 分鐘，時間太久會發(fā)熱導致流動相成分改變）；

d、除了特殊標注，色譜柱的使用 pH 值在 2-8 之間，如果樣品溶解的 pH 較苛刻，請使用保護柱來抵御 pH 所帶來的損傷，并及時更換；

e、不要把未標注能耐受純水的色譜柱使用在水相大于 95% 的流動相條件下。