色譜柱擔(dān)體(或載體)組成
色譜柱是一種化學(xué)惰性的多孔固體顆粒,支持固定液,表面積大, 穩(wěn)定性好(化學(xué)、熱),顆徑和孔徑分布均勻;有一定的機(jī)械強(qiáng)度,不易破碎。
(1)擔(dān)體的種類和性能:
硅藻土型:紅色硅藻土擔(dān)體—強(qiáng)度好,但表面存在活性中心,分離極性物質(zhì)時(shí)色譜峰易拖尾;常用于分離非、弱極性物質(zhì)。
白色硅藻土擔(dān)體—表面吸附性小,但強(qiáng)度差,常用于分離極性物質(zhì)。
非硅藻土型擔(dān)體:
有氟擔(dān)體,適用于強(qiáng)極性和腐蝕性氣體的分析;玻璃微球,適合于高沸點(diǎn)物質(zhì)的分析;高分子多孔微球既可以用作色譜的吸附劑,又可以用作色譜的擔(dān)體。
(2)擔(dān)體的預(yù)處理:除去其表面的活性中心,使之鈍化。
酸洗法(除去堿性活性基團(tuán));
堿洗法(除去酸性活性的基團(tuán));
硅烷化(消除氫鍵結(jié)合力);
釉化處理(使表面玻璃化、堵住微孔)等。
如何儲(chǔ)存色譜柱
1.防止緩沖溶液和水溶液流動(dòng)相產(chǎn)生微生物,做到流動(dòng)相用多少配多少,或在水流動(dòng)相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細(xì)菌成長(zhǎng)(一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性);或在流動(dòng)相中加20%的有機(jī)改性劑,也可抑制微生物生長(zhǎng),有機(jī)改性劑還有助于流動(dòng)相脫氣。
2.盡可能將色譜柱貯存于100%有機(jī)溶劑中,避免在緩沖溶液中保存。
3.使用緩沖溶液后的色譜柱,應(yīng)用15~20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機(jī)溶劑流動(dòng)相沖洗色譜柱,后換成100%有機(jī)溶劑儲(chǔ)存。
4.避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。
5.將色譜柱的兩端用堵頭擰好,以免柱床填料干裂。