液相色譜柱的系統(tǒng)由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng),樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相,被流動(dòng)相載入液相色譜柱(固定相)內(nèi)。
什么情況下會(huì)造成液相色譜柱柱壓過高
液相色譜柱的柱壓高,首先想到的是堵,一是考慮的是儀器管路問題,二是考慮的是色譜柱問題,逐一進(jìn)行排除:
1.拆去保護(hù)預(yù)柱,看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問題,若柱壓仍高,再檢查;
2.把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降正常,則是色譜柱堵塞問題;
3.針對(duì)色譜柱緩沖液鹽分沉積于柱內(nèi)堵塞;建議把柱子好好沖一次,用100%甲醇-70甲醇-50甲醇-30甲醇-水沖,然后再按照這個(gè)順序反著沖,每個(gè)流動(dòng)相沖半個(gè)小時(shí),之后用純甲醇開始沖洗柱子30分鐘;
4.由于分析樣品污染沉積堵塞。對(duì)于這種沉積污染的c18柱,用純水反向沖洗柱子,使用二氯甲烷:甲醇:氨水=96:4:1沖洗效果不錯(cuò)。配置時(shí)先用甲醇把氨水溶解了再加二氯甲烷,使用這個(gè)流動(dòng)相要注意其與上個(gè)使用和下個(gè)使用的流動(dòng)相是否相容的問題。也可以換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇沖洗柱子(沖洗時(shí)間的長短由樣品污染的情況而定),再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上。
5.既無壓力指示,又無液體流過的原因:
(1)泵密封墊圈磨損;更換密封墊圈;
(2)大量氣泡進(jìn)入泵體。在泵作用的同時(shí),用一個(gè)玻璃針筒在泵的出口處幫助抽出空氣。本文章由液相色譜儀生產(chǎn)廠家山東魯創(chuàng)分析儀器有限公司整理提供。